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震撼新品首發—Meilunbio快速FITC 抗體(蛋白)標記試劑盒!!!
2019-05-30  來源:美侖生物

 

Meilunbio快速FITC抗體(蛋白)標記試劑

MA0362     3 Labelings [¥2500.00]

FITC相關參數

激發/發射(nm):

494⁄518

染料:

Fluorescein (FITC)

標記規格

0.5-1 mg

標記目標:

蛋白質(抗體)

產品規格:

3 T

美侖快速FITC 抗體(蛋白)標記試劑盒 (Quick FITC Antibody(protein) LabelingKit)包含蛋白質標記染料和去除多余染料所需的全部組分。異硫氰酸熒光素(FITC)可以與蛋白質上的氨基,巰基,咪唑基,酪氨酰基和羰基發生交聯反應。然而,只有伯胺和仲胺的衍生物才能產生穩定的標記產物。反應在pH 8-9下效率最高,并且必須在無胺緩沖液如硼酸鹽或碳酸鹽/碳酸氫鹽中進行。通常,蛋白質與15至20倍摩爾數的FITC反應,可導致幾個FITC分子與一個蛋白質分子結合。裝填有純化樹脂的離心柱簡化了柱平衡、收集和監測重力流分的步驟。該系統能夠有效去除多余的FITC,從而準確測定染料與蛋白的比例(F/P)和蛋白濃度。

本試劑盒可用于標記和純化3次 1 mg (2mg/mL)或者6次0.5mg (2mg/mL)的IgG或其他蛋白質。

試劑盒特點:

•操作簡單,可在約一小時完成蛋白標記和純化

•優化的F/P值

•無需稱量微量粉末; 試劑盒包含一次性試劑瓶

•高效的純化試劑盒包括純化樹脂和離心柱,確保快速有效地去除未反應的染料并擁有優異的蛋白質回收率

 

應用:標記抗體或者含有伯氨的蛋白質、多肽。

以事實為依據,與進口對比毫不遜色

圖1. 美侖與進口品牌FITC 標記抗體流程及結果對比。美侖標記的FITC-IgG的F/P=2.4,好于進口品牌(0.189),并且在規定范圍內,而且蛋白收率與進口品牌相當。

圖2.本組數據分別采用商業化熒光二抗、進口品牌和美侖熒光標記試劑盒制作的FITC-IgG(羊抗鼠),用于免疫熒光流式檢測Hela細胞GAPDH。由圖可知,美侖與進口品牌試劑盒相比,FITC-IgG二抗背景熒光幾乎相同,都在正常范圍以內,但美侖實驗組的檢測效果更好,而且所用抗體量也最少。相同實驗處理條件下,美侖的檢出陽性率可達93.64%,與商業化熒光二抗檢測出的陽性率相近(96.53%),說明美侖熒光標記試劑盒純化得到的熒光二抗可以媲美商業化抗體,可以用于標記實驗。

圖3. A549-GAPDH細胞爬片免疫熒光鏡檢。采用美侖試劑盒標記的進行標記的FITC-IgG(goat anti-rabbit)熒光二抗,熒光顯微鏡40倍物鏡拍攝,綠色熒光表示熒光標記的GAPDH,藍色熒光代表細胞核。

圖4. FITC標記BSA獨立重復實驗。FITC-BSA測得的參數進行對比,可以看出重復性非常好,F/P值以及蛋白濃度近乎一致

 

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